凯氏定氮仪是具有多种生物学功能的糖蛋白

时间:2016/11/26 10:08:36 浏览:

A/M)序列,并通过它与细胞膜上特异的整合蛋白受体结合凯氏定氮仪,人工合成的 4K$短肽可抑制 !-与受体的结合。 !-的含糖量为 HN G=FN,每个亚单位上可有 O GH个 "连接糖链,集中分布在与胶原蛋白结合的结构域内,其影响 !-与胶原蛋白的结合力及对蛋白酶的抗性。存在于 63B中或细胞表面的 !-为不溶性的 !-纤维, !-还有存在于血液和体液中的溶解形式。不同组织来源的 !-糖链结构有差别。 !-与肝素、纤维蛋白、胶原蛋白、 $"A、细胞及与肌动蛋白和蛋白聚糖等的结合,可引发一系列细胞内和细胞外的变化。因此, !-的组织分布和结构特点决定了 !-是具有多种生物学功能的糖蛋白,参与细胞的增殖、分化和迁移、血液凝固、炎性浸润等多种过程。图 & ’(白细胞与内皮细胞的分子识别 图 & J(纤连蛋白的结构域示意图 (((=)层连蛋白 (层连蛋白主要存在于基底膜中。基底膜也是 63B的一种形式,除 5-外,还包括巢蛋白(0-2:12,-,-,?*.0-)、硫酸肝素蛋白聚糖和 !型胶原等。 5-的相对分子质量为 PHF FFF G QFF FFF。5-分子由 &个不同的亚基(!,",#),通过二硫键连接形成长约 JF -<的十字型结构(图 &P)。目前已经发现每种亚基又有 & GH个类型,可组合成多种 5-分



子。 5-结构中有与 5-受体结合的 4K$序列,这类 5-受体也为整合蛋白家族成员。 5-还有巢蛋白、硫酸类肝素蛋白聚糖(主要为串珠蛋白聚糖, M0)+01:-)、!型胶原及细胞的结合区。这些分子通过 5-相互交织,构成基底膜的网状结构; 5-与上皮细胞及内皮细胞的结合,有助于将这些细胞黏着和固定于基底膜上。 5-对肾小球基底膜的结构及滤过功能起重要作用。 5 !!第一篇 *生物分子的结构与功能含糖为 !"# $ !%#,主要为 &连接糖链。用 &连接糖链合成抑制剂衣霉素处理后的 ’(,则对体外培养细胞的铺展性生长起抑制作用。已经发现, ’(有促进多种肿瘤细胞生长、浸润和转移的作用。除上述提到的整合蛋白受体外,与 ’(结合的还有一类非整合蛋白受体,可识别 ’(分子中的寡糖,如细胞膜表面的 !!,)半乳糖基转移酶。 **(+)整合蛋白 *整合蛋白广泛存在于各种细胞膜上,是由 !和 "两个亚基构成的异二聚体糖蛋白, !和 "亚基的相对分子质量为 ,----$ !.----。!亚基有 ")种, "亚基有 ,种,它们所组成的整合蛋白家族是根据 "亚基分类的,如最大的 " !整合蛋白家族有 !! " !,!" " !,及 !+ " !等 !"种。整合蛋白结构分为胞外、跨膜和胞内三部分(图 +,),"亚基胞外部分含丰富的二硫键,形成较紧密的折叠结构, !亚基上有二价阳离子(/0" 1,23" 1)的结合部位,并有一个链内二硫键。整合蛋白通过 !和 "亚基的胞外部分形成的特异结合区与 4/2中含 567的黏附分子结合,如 !! " !


与 ’(和胶原, !% " !与 8(,及 !9 " !与 ’(间的特异结合等。整合蛋白还通过胞内部分与细胞骨架蛋白结合,参与细胞黏着斑的构成,并介导多种信号转导途径。整合蛋白主要含 &连接聚糖,对维持分子空间构象等有作用。如 !% " !整合蛋白可分别用 !%或 " !亚基单克隆抗体以二聚体的形式沉淀出来,而用内切糖苷酶切去亚基的聚糖后,则两种单抗只能沉淀各自的 !%或 " !单体。当 " !亚基糖基化降低后,则使整合蛋白与 8(和 ’(的结合能力减弱。整合蛋白是细胞内外双向交流的桥梁,通过所介导的多种信号转导途径引起细胞的多种生物学功能变化。图 + ,*整合蛋白的分子结构示意图 **(三)糖蛋白与医学 **目前,已经发现许多疾病的发生与糖蛋白糖链的合成和降解、结构和功能的异常密切相关。 **例如,糖蛋白糖链的降解是溶酶体内多种特异的外切糖苷酶和内切糖苷酶逐步水解的过程(图 + !-)。糖苷酶基因的遗传性缺陷或酶活性降低,均可使其未完全降解的糖代谢产物在体内堆积,引起多种代谢病。如唾液酸酶或岩藻糖酶的异常,可引起相应的唾液酸过多症和岩藻糖过多症。 * * :;<血型系统中的抗原为 :、;和 <(=),是连接于糖蛋白和糖脂上的寡糖链。三种抗原结构的差别仅在于 :和 ;抗原比 <抗原的糖链末端各多一个>&:?或 60>(图 + !!)。添加 60>&:?和 60>的


是 60>&:?糖基转移酶和 60>糖基转移酶,二者分别由位于 ,号染色体的 :等位基因和 ;等位基因编 第三章 $糖复合物"!码。因此,遗传基因的不同是决定血型的分子基础。血型不同的输血可引起溶血反应。 $ $一些致病微生物的凝集素样物质 — ——黏附素(()*+,-.)对宿主细胞表面糖结构(配体)的识别和结合,是引起感染的必要因素。例如,肺炎球菌主要识别细胞表面的 /01%21。自身免疫病,如类风湿图 ! "#$糖苷酶对 %糖链的降解作用 关节炎和 342肾病有相似的发病机制,二者分别有 !内切糖苷酶 &$ "内切糖苷酶 ’ $ #唾液酸酶 $ $ !半乳糖苷酶 $ % ! 甘露糖苷酶34/和 342分子糖链末端唾液酸和半乳糖的缺失,机体将糖链截短的 34/或 342视为“异己 ”,并产!乙酰葡糖胺糖苷酶 $ & "甘露糖苷酶 $ ’ !生相应的自身抗体,所形成的免疫复合物又在关节腔或肾系膜沉积,进而造成病理性损伤。 $ $肿瘤细胞表面糖链可有多种改变,如出现 %聚糖中 ! ",7分支增加等天线数目和结构的改变, 89+:及 89+(含量增加等。它们与肿瘤的生长、侵袭和转移等密切相关。研究发现:肿瘤细胞表面糖链的变化主要是由于相关的糖基转移酶的异常所致。目前,在人类已经发现了 !##余种糖基转移酶。 $ $依据糖的功能及作用机制所研制的糖类药物图 ! ""$ 256血型的糖抗原结构和疫苗不断出现。通过基因工程方法生产糖蛋白类药物是现代生物制药的一个标志性成就。重组糖蛋白类药物,如 ;<=、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子及组织纤溶酶原激活物等分子中的聚糖对其整个分子的结构、稳定性、作用及药代动力学等有很大的影响。因此,控制糖蛋白的糖基化,保证重组糖蛋白具有天然糖蛋白的功能,或通过糖基化条件的优化来延长药物在血液中的半衰期及实现特异组织的靶向等,已经成为药物设计和生产中的关键要素。糖链的唾液酸化程度对于许多重组糖蛋白都非常重要。例如, ;<=的三条 %糖链为唾液酸化的,唾液酸化不足的 ;<=在体内的活性低于其在体外活性的>以上。糖在生物医药中的应用显示出广阔的前景。第三节 $蛋白聚糖 $$蛋白聚糖(



),因此,整个分子主要表现聚糖的性质。糖胺聚糖和核心蛋白结构与特性的不同,使蛋白聚糖的种类、性质、组织分布及功能等各异。一、蛋白聚糖的结构 $$(一)糖胺聚糖 $$糖胺聚糖是己糖胺和己糖醛酸二糖重复单位的聚合物,无分支。己糖胺(糖胺聚糖由此命名)为 /01H %21或 /(0%21,己糖醛酸为 /01I2或 3)=I2。糖胺聚糖主要有 7种:透明质酸(*D(0JB=.-1 (1-),’2)、硫酸软骨素(1*=.)B=-C-. ,J0K(C+,L8)、硫酸皮肤素()+BE(C(. ,J0K(C+,M8)、硫酸角质素( N+B(C(. ,J0K(C+,O8)、肝素(*+<(b-.,’<)和硫酸类肝素(*+<(b(.>?结合有肝素,主要存在于肥大细胞的颗粒中,是一种典型的细胞内蛋白聚糖。 !!(三)糖胺聚糖和核心蛋白的连接 !!除透明质酸游离存在外,其余糖胺聚糖均以蛋白聚糖的形式存在。与核心蛋白的连接具有糖蛋白中糖链和多肽链类似的 1糖链和 5糖链的方式。 "#"中, 2-、;-、+<和 +-与核心蛋白连接点的结构为: "$%&# "0$ "0$ DA$ ->?,为蛋白聚糖型(
凯氏定氮蒸馏器
定氮仪
-30低温恒温槽-立式
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